基于UHPLC Q-Exactive Orbitrap MSn和分子网络技术快速鉴定吴茱萸汤中化学成分

《伤寒论》名方吴茱萸汤是首批《古代经典名方目录》收载品种,全方由吴茱萸、人参、生姜、大枣4味药组成,具有温中补虚、散寒降逆之功,临床应用广泛,疗效显著。经典名方化学组成是其物质基准和量值传递的重要前提,该研究旨在建立高分辨质谱(HR-MS)和分子网络整合的快速分析经典名方吴茱萸汤中化学成分的方法。采用AQUITY UPLC BEH C₁₈色谱柱(2.1 mm×100 mm, 1.7μm),以乙腈-0.1%甲酸水为流动相进行梯度洗脱。分别在正、负离子模式下,采集Q-Exactive Orbitrap MS数据,根据MS/MS碎片模式的相似性创建GNPS分子网络,运用Cytoscape 3.6.1软件筛选结构相似的分子簇,最后根据对照品比对,并结合保留时间信息、高分辨质谱精确相对分子质量和MS/MS碎片信息对吴茱萸汤中化学成分进行快速准确鉴定。在吴茱萸汤中共鉴定出105种化学成分。该研究可为经典名方吴茱萸汤进一步的质量控制、基准物质研究以及药效物质研究等提供参考数据,同时也为中药化学成分的快速定性分析提供借鉴。     

温阳、解郁及温阳解郁方对母婴分离结合慢性神经疼痛应激小鼠疼痛敏感性及抑郁样行为的调节作用

目的 观察母婴分离小鼠给予慢性神经疼痛应激后的行为、痛阈改变，以及血清和中枢抑郁、疼痛相关指标的变化，以温阳方、解郁方、及温阳解郁方进行干预探讨温阳解郁法抗抑郁、改善疼痛敏感的可能机制。方法 以小鼠出生日为PD0，小鼠在出生后随机分为对空白组和母婴分离组，母婴分离组在PD5~14进行8 h·d^-1的母婴分离，离乳后将其分为母婴分离组、温阳组、解郁组、温阳解郁组和氟西汀组，每组15只，同时以15只未经母婴分离的同期雄性仔鼠作为空白组。空白组、母婴分离组小鼠于PD21~90以普通发育饲料喂养，余组分别以温阳方二仙汤、解郁方逍遥散、温阳解郁方及氟西汀药混饲料喂养（用药剂量分别为5.84、12.00、16.68 g·kg^-1及2.60 mg·kg^-1）。于PD91行坐骨神经结扎手术，建立母婴分离+慢性神经病理性疼痛模型。采用旷场实验观察各组小鼠抑郁样行为，测量机械痛阈和温度痛阈检测各组小鼠疼痛敏感性，酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清皮质酮（CORT）、P物质及β-内啡肽（β-EP）含量，免疫组化检测杏仁核糖皮质激素受体（GR）和下丘脑β-EP蛋白表达，实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测杏仁核糖皮质激素受体基因（Nr3c1）、FK506结合蛋白5基因（FKBP5）、代谢型谷氨酸受体5基因（GRM5）及脑源性神经营养因子（BDNF）mRNA的表达量。结果 与空白组比较，母婴分离组小鼠5 min旷场中心停留时间和运动总距离均显著减少（P<0.01），机械痛阈显著降低（P<0.01）。血清CORT和β-EP均显著上升（P<0.01），FKBP5 mRNA表达显著下降（P<0.01）。下丘脑β-EP表达上升，差异具有明显统计学意义（P<0.05）。与母婴分离组比较，各给药组5 min旷场中心停留时间均明显增加（P<0.05，P<0.01），温阳组、温阳解郁组和氟西汀组小鼠在5 min旷场运动总距离明显增加（P<0.05，P<0.01），各给药组痛阈均不同程度上调。解郁组小鼠血清CORT显著下降（P<0.01），β-EP明显下降，但差异无统计学意义；BDNF mRNA显著上升（P<0.01）。温阳组小鼠Nr3c1及GRM5 mRNA均明显下降（P<0.05，P<0.01）。温阳解郁组小鼠血清CORT明显下降（P<0.05），Nr3c1、GRM5及BDNF mRNA均下降（P<0.05，P<0.01），差异具有明显统计学意义，各给药组下丘脑β-EP表达水平均有不同程度提升，但差异无统计学意义。温阳组、解郁组和温阳解郁组小鼠杏仁核GR表达水平均明显上升，差异具有明显统计学意义（P<0.05）。结论 温阳解郁方可通过增强杏仁核GR表达、抑制杏仁核区神经可塑性及兴奋性达到抑制中枢疼痛敏化和调节下丘脑-垂体-肾上腺（HPA）轴功能，缓解抑郁行为和改善躯体疼痛过敏的作用。     

疏肝通络方治疗糖尿病合并非酒精性脂肪肝临床研究

目的：观察疏肝通络方治疗糖尿病合并非酒精性脂肪肝（ NAFLD ）的临床疗效。方法将120例糖尿病合并NAFLD的患者随机分为治疗组60例、对照组60例,在控制血糖的基础上,对照组采用健康教育、改变生活方式等措施治疗,治疗组在上述基础上加用疏肝通络方口服。结果治疗组60例中,完全缓解5例（8．33％）,显效31例（51．67％）,有效17例（28．33％）,无效7例（11.67％）,总有效率为88．33％;对照组59例中,完全缓解2例（3．39％）,显效12例（20．34％）,有效16例（27．12％）,无效29例（49．15％）,总有效率为50．85％。经Ridit分析,U＝－5．122, P＜0．001,说明治疗组总体疗效优于对照组。2组中医症状积分治疗后较本组治疗前均降低（ P＜0.01）,治疗组较对照组降低更明显（P＜0．05）,说明治疗组优于对照组。2组ALT,AST,TG,TC, LDL-C治疗后均较本组治疗前均降低（P＜0．05,P＜0．01）,治疗组ALT,AST,TG,TC,LDL-C较对照组降低明显（P＜0．05）。 BMI治疗组较治疗前降低（P＜0．01）,对照组治疗前后比较差异无统计学意义（ P＞0．05）。结论疏肝通络方治疗糖尿病合并NAFLD具有较好的疗效。     

硝酸甘油软膏治疗肛裂的多中心随机对照研究

目的评价硝酸甘油软膏治疗肛裂的临床疗效和安全性。方法采用多中心、随机、双盲、安慰剂平行对照的临床试验方法,从7个临床中心入组240例慢性肛裂患者,按随机数字表法随机分为试验组（硝酸甘油软膏,120例）和对照组（凡士林软膏,120例）,疗程为8周。比较两组肛裂愈合率、肛裂疼痛强度VAS评分、肛管静息压的变化及不良反应事件发生率。结果共有221例（92．1％）完成了试验,其中试验组114例,对照组107例。治疗终点（56d）,试验组和对照组肛裂愈合率分别为78．9％（90／114）和29．0％（31／107）,排粪后肛裂疼痛VAS评分下降率分别为（94．8±15．7）％和（61．2±35．7）％,差异均有统计学意义（均P〈0．01）。试验组和对照组分别有12例和6例患者接受了肛门直肠测压,首次用药前后肛管静息压下降值试验组为（20．2±18．5）mmHg,对照组为（7．1±14．7）mmHg,但两组差异并无统计学意义（P=0．152）。试验组不良反应事件发生率明显高于对照组[42．1％（48／114）比913％（10／107）,P〈0．05],但不良反应事件主要为轻度的头痛、头胀,可自行缓解。结论硝酸甘油软膏可有效缓解肛裂疼痛,促进肛裂愈合,且使用安全、耐受性好。     

基于复杂网络技术探讨针刺治疗腹型肥胖的腧穴配伍规律

目的：运用复杂网络技术分析针刺治疗腹型肥胖的腧穴配伍规律，为临床针刺治疗腹型肥胖提供选穴依据和治疗思路。方法：检索中国期刊全文数据库(CNKI)、中文科技期刊数据库(VIP)、中国学术期刊数据库(万方数据)、中国生物医学文献数据库(CBM)、PubMed及Web of Science从建库至2022年11月1日收录的针刺治疗腹型肥胖的临床研究文献，依据纳入和排除标准进行文献筛选，将符合标准的文献资料录入Microsoft Excel 2013,建立针刺处方数据库，并进行频次分析，采用SPSS Modeler 18.0软件建模并运用Apriori算法进行关联规则分析，利用Gephi 0.9.7软件进行复杂网络分析。结果：共纳入文献79篇，涉及腧穴94个，总腧穴使用频次为1 083次，使用频次前5位的腧穴分别为中脘、天枢、足三里、丰隆和大横，经脉主要选用足阳明胃经、任脉和足太阴脾经，特定穴主要选用五输穴、募穴。关联规则显示相关性最高的腧穴组合为中脘-天枢，支持度最高的腧穴组合为中脘-大横。针刺处方数据库复杂网络k-core层次分析和社团分析结果显示，针刺治疗腹型肥胖主穴处方共包含11个核心...     

中医药临床优势病种探讨——纤维肌痛综合征

纤维肌痛综合征（FMS）是一种以全身弥漫性疼痛为主要特征的难治性、慢性非关节性风湿病，目前尚无满意的治疗药物和治疗方案。中医药治疗方法众多，部分特色非药物疗法，如针刺、太极拳、八段锦等已显示出较为满意的疗效和安全性，具有明确的“身心同调”治疗优势和特点，2018年被国家中医药管理局纳入中医优势病种。为了明确FMS领域的研究进展和中医/中西医结合临床优势，中华中医药学会组织中西医风湿专业、心理专业、针灸脑病专业及产业等近20名专家围绕“FMS临床诊疗难点和中西医优势”进行了研讨，就FMS早期诊断的难点和应对、常见非特异症状的改善与维持、优选镇痛疗法、中医基本病机和治疗优势、中西医结合治疗方向等焦点问题形成以下建议。FMS目前面临早期正确诊断率低、患者参与度差、单纯西医治疗获益不理想这三重困境，为解决以上问题，该文建议以风湿科医师作为本病的主要诊断力量，提升患者在治疗决策中的参与程度，积极实施运动疗法，充分发挥中医药整体多维的特点，在减轻疼痛、改善情绪、降低不良反应等多方面起效，并倡导FMS治疗注重中西医并重和多学科联合治疗，旨在提高我国FMS诊疗水平。     

柴贝止痫汤添加治疗难治性癫痫复杂部分性发作的临床研究

目的观察评价刘金民教授治疗难治性癫痫经验用方柴贝止痫汤联合抗癫痫药物(anti-epileptic drugs,AEDs)治疗难治性癫痫复杂部分性发作的临床疗效和安全性。方法选择符合诊断和纳入标准的病例60例,随机分为治疗组和对照组,分别给予AEDs添加柴贝止痫汤及单纯的AEDs治疗。定期随诊并记录治疗后患者的痫性发作频率、中医症状积分及不良反应等。以痫性发作频率、中医症状积分及脑电图异常程度的改善程度作为疗效判定标准。结果在改善患者的痫性发作频率方面,经Wilcoxon秩和检验,治疗12周后,治疗组疗效优于对照组(P0.05);经χ2检验,治疗8周、12周后,治疗组疗效优于对照组(P0.05)。在改善患者的中医症状积分方面,经Repested Measures检验(Greenhouse-Geisser法校正),治疗4周、8周、12周的不同观测时点、观测时点与组别的交互作用及组别之间的差异均具有统计学意义(P0.05);经χ2检验,治疗8周、12周后,治疗组疗效优于对照组(P0.05);经秩和检验,治疗4周后,在失眠症状积分上,治疗组疗效优于对照组(P0.05),治疗8周、12周后,在胸闷、痰多、疲乏、失眠四个症状积分上,治疗组疗效优于对照组(P0.05)。结论柴贝止痫汤添加用药治疗难治性癫痫复杂部分性发作,在改善患者的痫性发作频率及中医症状积分上均有明显的优势,且随着疗程的延长,疗效逐渐显著,未发现任何不良反应。柴贝止痫汤添加治疗难治性癫痫复杂部分性发作安全、有效。     

溃疡性结肠炎患者血清及结肠组织α_1-抗胰蛋白酶水平与肺功能损害相关性研究北大核心CSCD

目的观察溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)患者血清及结肠组织α1-胰蛋白酶(α1-antitrypsin,A1AT)水平与肺损害的相关性,探讨UC肺损害的发生机制。方法将90例确诊为UC的患者,按病变范围、活动度、病情分期及病程进行分组,比较不同病变范围、活动度、病情分期及病程的UC患者血清A1AT水平;选择30名健康志愿者作为对照组,检测UC组及对照组血清肝、肾功能水平及肺功能,并比较两组间肝、肾功能,肺功能及血清A1AT水平的差异。分析UC患者各肺功能指标与血清A1AT的相关性。采用免疫组化法检测20例UC患者及10名健康志愿者结肠组织A1AT含量。结果 90例UC患者中,伴有肺功能异常者54例(60.0%),伴有其他UC肠外表现者24例(26.7%)。与对照组比较,UC组血清A1AT水平明显下降(P<0.05);病变范围为远端结肠及广泛结肠者血清A1AT水平较病变范围局限在直肠者明显下降(P<0.05);病程≥5年者血清A1AT水平较病程<5年者明显下降(P<0.05);病变范围为远端结肠及广泛结肠者肺功能通气指标中肺活量(vital capacity,VC);用力肺活量(forced vital capacity,FVC);一秒量(forced expiratory volume in one second,FEV1.0),肺容量指标中肺总量(total lung capacity,TLC)、功能残气量(function residual volume,FRV)及肺弥散指标中一氧化碳弥散量(diffusion capacity for carbon monoxide of lung,DLCO)较病变范围局限在直肠患者均明显下降(P<0.05);UC患者病程与用力肺活量FVC呈直线负相关(r=-0.23,P=0.018);UC患者血清A1AT水平与峰流速峰流速(peak expiratory flow,PEF)呈正相关(r=0.22,P=0.03)。UC患者结肠A1AT水平明显低于对照组(P<0.05)。重度UC患者结肠A1AT水平较轻中度患者下降(P<0.05)。UC患者结肠A1AT水平高于远端结肠炎及广泛结肠炎患者(P<0.05)。结论 UC患者肺功能异常的发病率高于UC其他肠外表现,肺功能检测有助于提前筛查UC肺损害。UC患者血清及结肠组织中A1AT水平均明显下降,提示UC患者的肺功能损害主要表现为与A1AT水平下降相关的慢性气道炎症、气道重塑及阻塞性改变。     

反复脑缺血再灌注小鼠造模影响因素的Logistic回归分析

目的分析反复脑缺血再灌注（RCIR）小鼠造模过程中体质量、操作者因素与造模结局之间的关系,以期降低造模过程中小鼠死亡率。方法取健康SPF级雄性昆明小鼠47只,进行编号,并记录体质量,进行RCIR造模,在造模的过程中始终标明小鼠编号进行跟踪,直至该小鼠成活或死亡时获取造模结局及操作者的数据,最后对记录的数据按照造模结局进行分类,将体质量、操作者作为变量,进行统计学分析,并综合进行Logistic回归多元统计分析。结果在体质量32.5~37.7 g范围内小鼠体质量与造模结局无关（P〉0.05）,操作者与造模结局也无关（P〉0.05）。结论在一定体质量范围内,造模结局与小鼠体质量、年资相仿并经过同期培训的手术操作者无关,对造模结局没有影响的小鼠体质量差可以扩大到5.2 g。     

中医药治疗耳鼻咽喉头颈外科领域临床优势病种的探讨

在耳鼻咽喉头颈外科常见病的诊疗中，中西医各有优势与局限。临床诊疗中，中西医结合治疗的疗效肯定，但在优势病种选择及诊疗方案选择方面尚无统一意见。中华中医药学会组织中西医耳鼻咽喉头颈科专家一起进行探讨，从病因、机制、临床诊疗方法等方面出发，基于多项临床研究结果，综合专家意见，推荐将急性咽炎、慢性咽喉炎、咽异感症、癔症性失音、过敏性鼻炎、主观性耳鸣、耳源性眩晕遴选为优势病种，制定出中西医融合的诊疗方案及建议并形成专家指导意见，供临床参考。以期通过中西医结合治疗，使更多的患者受益。